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SDS-PAGE凝胶电泳中蛋白染色液操作步骤详解

发表时间:2022-05-16

是一种即用型考马斯亮蓝蛋白染色液,用于PAM凝胶染色,无需固定、脱色等复杂操作,整个操作可在1小时内完成,染色10到15分钟就能看到蛋白条带,而背景几乎无色。染色液具有极高的灵敏度,过夜染色时,检测上限可达10ng。不含甲醇和乙酸等有毒或挥发成分,保证操作者的健康。且完全适用于质谱检测,不会对蛋白产生甲基化和乙酰化。

蛋白胶快速染色液主要应用于SDS-PAGE凝胶电泳:是对蛋白进行定性及半定量分析的最常用,最快速方便的技术。根据蛋白分子量的不同,将蛋白梯度分离。蛋白纯度和分子量分析,WB实验,IP实验都需要用到SDS-PAGE凝胶电泳

产品特点:
快速:最快10分钟即可观测到蛋白条带
便捷:无需固定、脱色
高灵敏度:检测上限10ng
背景清晰:高信噪比,过夜也不会染色过度
经济:每块胶仅需25ml染色液
操作说明:
  1. 电泳结束后,每块凝胶加入100ml去离子水,微波加热30s,水平摇床震荡漂洗5分钟,重复三次。
(此步为关键步骤,会极大的影响染色效果和灵敏度)
  1. 每块凝胶加25ml染色液,微波加热15s,水平摇床震荡。
  2. 蛋白条带会在10分钟开始逐渐显现,在1小时内达到90%染色效果。
  3. 脱色步骤一般没有必要,但可进一步降低背景。加入100ml自来水,水平摇床震荡30分钟即可。
Tips:
  1. 漂洗过程推荐用大号的1ml枪头盒,使凝胶能充分振荡起来。染色推荐用小号的1ml枪头盒。
  2. 一个盒子可同时放入2块胶进行漂洗和染色(请勿过多,会影响效果),漂洗的去离子水和染色液加倍。
  3. 染色液于室温避光,可保存一年。
  4. 染色液通常不建议回收使用,染色效果会变差,如有必要最多重复使用1次,回收的染液请保存在棕色瓶内。
实例:
12%SDS-PAGE,8cm*8cm*1.5mm,染色5min 12%SDS-PAGE,8cm*8cm*1.5mm,染色10min
12%SDS-PAGE,8cm*8cm*1.5mm,染色15min 12%SDS-PAGE,8cm*8cm*1.5mm,染色30min

与市面常见的传统染色液相比
传统染色液:气味刺鼻,有害,染色1h,脱色2h,耗时长。

快速染色液:无刺激组分,无需脱色,所有操作1小时内完成。
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